721分光光度计是一种经典且广泛应用的可见光分光光度计,在化学分析领域发挥着重要作用。它通过对物质在特定波长下吸光度的测量,实现对物质含量的定量分析以及物质结构的定性研究。 一、仪器预热与检查
在使用之前,先要进行仪器预热。接通电源后,打开仪器开关,让仪器预热,使仪器各部件达到稳定的工作状态。同时,检查仪器的外观是否完好,比色皿架是否清洁,波长调节旋钮是否灵活,以及吸光度显示是否正常等。
1、波长选择
根据待测物质的吸收特性,选择合适的测量波长。通常可以通过查阅相关资料或进行预实验来确定较佳波长。在721分光光度计上,通过旋转波长调节旋钮来设置所需的波长值。
2、比色皿的准备与校准
比色皿是分光光度计中用于盛放样品溶液的重要部件。在使用前,需要选择与仪器配套的比色皿,并确保其清洁、透明且无划痕。为了消除比色皿之间的差异对测量结果的影响,需要进行比色皿的校准。通常采用空白溶液分别装入各个比色皿中,在选定的波长下测量其吸光度,然后调整仪器的零点,使吸光度为零。接着,依次测量各个比色皿的吸光度,记录下偏差值,在后续测量中根据偏差值对测量结果进行修正。
3、标准曲线的绘制
为了实现对未知样品的定量分析,需要先绘制标准曲线。
配制一系列不同浓度的标准溶液,浓度范围应涵盖待测样品的可能浓度范围。
将标准溶液依次倒入比色皿中,放入分光光度计的样品池中进行测量,记录下每个标准溶液在选定波长下的吸光度值。以标准溶液的浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。通过线性回归分析,得到标准曲线的方程和相关系数。
二、未知样品的测定
在完成标准曲线的绘制后,即可对未知样品进行测定。将未知样品处理成溶液形式,倒入比色皿中,按照与标准溶液相同的测量条件进行测量,得到未知样品的吸光度值。将吸光度值代入标准曲线方程中,即可计算出未知样品中待测物质的含量。
三、注意事项
在使用光度计进行化学分析时,还需要注意一些事项。
1、要保证实验环境的稳定性,避免外界因素对测量结果的影响。
2、要注意仪器的清洁和维护,定期清洗比色皿和仪器内部,防止杂质和污垢对测量结果产生干扰。
3、在测量过程中要严格控制实验条件的一致性,以确保测量结果的准确性和可靠性。
使用721分光光度计进行化学分析需要严格按照操作规程进行,从仪器预热、波长选择到标准曲线绘制和样品测定,每一个环节都至关重要。